Το τεστ Coombs

Τι είναι το τεστ Coombs;

Το τεστ Coombs χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντισωμάτων κατά των ερυθρών αιμοσφαιρίων (ερυθροκύτταρα). Ένας λεγόμενος ορός Coombs χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό των αντισωμάτων, λαμβάνεται από τον ορό των κουνελιών και ευαισθητοποιείται στα ανθρώπινα αντισώματα.
Η δοκιμή χρησιμοποιείται εάν αιμολυτική αναιμία, ασυμβατότητα ρέζου ή λίγο πριν υποπτευθεί μετάγγιση αίματος. Η αιμολυτική αναιμία είναι μια μορφή αναιμίας και η ασυμβατότητα του ρήσου περιγράφει μια ασυμβατότητα μιας ομάδας αίματος.
Υπάρχουν δύο διαφορετικοί τύποι δοκιμών Coombs, ο άμεσος και ο έμμεσος έλεγχος διαφέρουν ως προς την ένδειξη και την εκτέλεση.

Οι λόγοι για ένα τεστ Coombs

Το άμεσο τεστ Coombs χρησιμοποιείται εάν υπάρχει υποψία αιμολυτικής αναιμίας. Η αιμολυτική αναιμία περιγράφει την αναιμία στην οποία τα αιμοσφαίρια διαλύονται πρόωρα λόγω βλάβης.
Σε αυτοάνοσες ασθένειες όπως συστηματικός ερυθηματώδης λύκος, ρευματοειδής αρθρίτιδα ή χρόνια λεμφική λευχαιμία, σχηματίζονται αντισώματα που στρέφονται εναντίον των κυττάρων του αίματος του ίδιου του σώματος (τα λεγόμενα ερυθροκύτταρα). Η δέσμευση των αντισωμάτων οδηγεί στην πρόωρη διάσπαση των αιμοσφαιρίων ή στη συσσώρευση των αιμοσφαιρίων στα αγγεία. Και τα δύο οδηγούν σε μείωση της τιμής της αιμοσφαιρίνης.

Μια άλλη ένδειξη για το άμεσο τεστ Coombs είναι η αιμολυτική νόσος neonatorum, εδώ σχηματίζονται αντισώματα κατά του παράγοντα ρήσου στο σώμα της μη-ρήσου αρνητικής μητέρας. Εάν το αγέννητο παιδί είναι θετικό σε ρήσο, τα αντισώματα της μητέρας μπορούν να εισέλθουν στην κυκλοφορία του εμβρύου και να προκαλέσουν αυξημένη διάσπαση των αιμοσφαιρίων εκεί. Τα νεογέννητα ξεχωρίζουν με σοβαρή αναιμία και ίκτερο.

Το τεστ Coombs χρησιμοποιείται τακτικά στην ιατρική μετάγγισης. Χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό των ομάδων αίματος πριν από μια μετάγγιση αίματος (κομοδίνο), στην οποία ένα μικρό δείγμα αίματος αναμιγνύεται με διάφορους ορούς από ομάδες αίματος Α, Β, ΑΒ και 0. Εάν το αίμα παραμείνει υγρό, το αίμα του ασθενούς είναι συμβατό με την αντίστοιχη ομάδα αίματος. Η μετάγγιση μπορεί να πραγματοποιηθεί.

Η έμμεση δοκιμή Coombs μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για την αναζήτηση δωρεάν αντισωμάτων στο σώμα του ασθενούς (δοκιμή αναζήτησης αντισωμάτων) π.χ. κατά τον έλεγχο της μητρότητας, σε προετοιμασία για μετάγγιση για ογκολογικούς ασθενείς ή άτομα που έχουν ήδη λάβει μετάγγιση αίματος.

Μάθετε τα πάντα για το θέμα εδώ: Η δυσανεξία στο Rh.

Η προετοιμασία

Κατά την προετοιμασία για τη δοκιμή Coombs, προετοιμάζονται πρώτα οι οροί με αντισώματα που πρόκειται να εξεταστούν. Γεμίζονται σε διαφορετικούς δοκιμαστικούς σωλήνες ή εφαρμόζονται σε δοκιμαστικές κάρτες.

Στην καθημερινή κλινική πρακτική π.χ. Με το τεστ δίπλα στο κρεβάτι υπάρχουν ήδη έτοιμες κάρτες δοκιμής που μπορούν να χρησιμοποιηθούν αμέσως. Στη συνέχεια, αίμα λαμβάνεται από τον ασθενή και προετοιμάζεται για τη δοκιμή. Ανάλογα με τον τύπο του τεστ Coombs που πραγματοποιείται, κάποιος χρειάζεται τα κύτταρα του αίματος ή τον ορό (υγρό μέρος του αίματος) του ασθενούς.

Η ακολουθία

Εάν πραγματοποιηθεί άμεση δοκιμή Coombs, τα ερυθρά αιμοσφαίρια φιλτράρονται από το αίμα του ασθενούς. Πρέπει να ελεγχθεί εάν υπάρχουν αντισώματα τύπου IgG σε αυτά, τα οποία προκαλούν αιμολυτική αναιμία ή ασυμβατότητα της ομάδας αίματος στο σώμα. Ο ορός Coombs περιέχει αντισώματα έναντι ανθρώπινων IgG αντισωμάτων. Το μείγμα θερμαίνεται (επωάζεται) για μεγάλο χρονικό διάστημα. Εάν υπάρχουν αντισώματα στα ερυθρά αιμοσφαίρια, συσσωρεύονται και το τεστ γίνεται θετικό.

Η έμμεση δοκιμή Coombs αποτελείται από δύο μέρη. Ο στόχος είναι να προσδιοριστούν αντισώματα που είναι ελεύθερα στο αίμα και δεν συνδέονται με τα κύτταρα του αίματος.
Αυτή τη φορά το υγρό τμήμα (ορός) διηθείται από το αίμα του ασθενούς. Αρχικά, προστίθενται στον ορό ερυθρά αιμοσφαίρια για τη δοκιμή. Εάν υπάρχουν ελεύθερα αντισώματα στον ορό, θα συνδεθούν με τα ερυθρά αιμοσφαίρια. Αυτή η αντίδραση δεν είναι ορατή. Μόνο στο δεύτερο βήμα, όπως στο άμεσο τεστ Coombs, προστίθεται και θερμαίνεται ορός Coombs με αντισώματα κατά ανθρώπινων αντισωμάτων. Και εδώ, η λύση συσσωρεύεται εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό.

Η αξιολόγηση

Εάν τα αντισώματα συνδυάζονται με έναν κατάλληλο ορό Cooms, αντισώματα στον ορό (υγρό μέρος του αίματος) συνδέονται με τα αντισώματα του ασθενούς. Τα αντισώματα έχουν σχήμα Υ, πράγμα που σημαίνει ότι μπορούν πάντα να δεσμεύουν δύο συνδετικούς εταίρους και έτσι να διασυνδέουν τα ερυθρά αιμοσφαίρια μεταξύ τους. Δημιουργείται μεγάλη συσσώρευση αιμοσφαιρίων. Αυτές οι συστάδες γίνονται ορατές - οι συσσωματώσεις του αίματος (συστάδες) και η δοκιμή είναι θετική.
Εάν ο ασθενής δεν έχει τα κατάλληλα αντισώματα, ο ορός παραμένει υγρός. Δεν μπορείτε να δείτε καμία αλλαγή - το τεστ είναι αρνητικό.

Ποιες είναι οι εναλλακτικές λύσεις;

Μια εναλλακτική λύση στο τεστ Coombs είναι η ανοσολογική μέθοδος ELISA (ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία), στην οποία ορισμένα αντισώματα επισημαίνονται με ένα ένζυμο. Αυτό το αντίσωμα προστίθεται στο διάλυμα δοκιμής. Εάν τα επισημασμένα αντισώματα αντιδρούν με τα αντισώματα στο διάλυμα δοκιμής, το δεσμευμένο ένζυμο ενεργοποιείται και παράγει μια βαφή. Οι αντίστοιχοι δοκιμαστικοί σωλήνες αλλάζουν χρώμα - η δοκιμή είναι θετική.

Εκτός από τη διαδικασία ELISA, υπάρχει επίσης το στύπωμα WESTERN, το οποίο χρησιμοποιείται συχνά ως επιβεβαιωτικό τεστ για θετική ELISA.